Gen anpil ewo enkoni bò kote nou, ki sanble òdinè, men an reyalite yo kontribye anpil an silans pou nou. Pwoteinaz K se "ewo enkoni" nan endistri dyagnostik molekilè a, byenke konpare ak "gwo ak pwisan" nan endistri a, pwoteyinaz K tèlman diskrè ke nou te neglije enpòtans li depi lontan. Avèk epidemi nouvo kouwòn lan, demann pou pwoteyinaz K te monte an flèche, epi rezèv la nan peyi a ak aletranje byen lwen dèyè konsomasyon an, epi tout moun te toudenkou reyalize ke pwoteyinaz K tèlman enpòtan.
Ki itilizasyon pwoteyinaz K?
Pwoteinaz K se yon pwoteyaz serin ki gen aktivite anzim pwoteyolitik epi li ka kenbe aktivite li nan yon pakèt anviwònman (pH (4-12.5), tampon ki gen anpil sèl, tanperati ki wo 70°C, elatriye). Anplis de sa, aktivite pwoteinaz K a pa anpeche pa SDS, ure, EDTA, kloridrat guanidin, izotiyosyanat guanidin, elatriye, epi yon sèten kantite savon kapab amelyore aktivite pwoteinaz K tou. Nan tretman medikal (dezenfeksyon viris ak mikwòb), manje (tandrisman vyann), kwi (adousi cheve), vinifikasyon (klarifikasyon alkòl), preparasyon asid amine (plim degrade), ekstraksyon asid nikleyik, ibridasyon in situ, elatriye, pwoteinaz K gen aplikasyon. Aplikasyon ki pi souvan itilize a se ekstraksyon asid nikleyik.
Pwoteinaz K ka anzimolize tout kalite pwoteyin nan echantiyon an, tankou iston ki byen lye ak asid nikleyik yo, pou asid nikleyik yo ka libere nan echantiyon an epi lage nan ekstrè a, sa ki fasilite pwochen etap ekstraksyon ak pirifikasyon an. Nan deteksyon asid nikleyik viral, pwoteyinaz K se youn nan konpozan enpòtan nan solisyon echantiyonaj viris la. Pwoteinaz K ka krake epi dezaktive pwoteyin kouch viris la, sa ki pi an sekirite pandan etap transpò ak deteksyon an; anplis de sa, pwoteyinaz K kapab degrade RNaz tou, anpeche degradasyon ARN viral la epi fasilite deteksyon asid nikleyik la.
Renome pwoteyinaz K a pandan lannwit lan
Kit se nan domèn rechèch syantifik la oswa nan domèn IVD a, ekstraksyon asid nikleyik la se eksperyans ki pi fondamantal la, kidonk proteinaz K te toujou yon egzistans trè enpòtan. Sepandan, nan tan lontan, proteinaz K te mwens byen koni pase wòl li. Yon gwo pati nan sa a te paske relasyon ant òf ak demann proteinaz K te trè estab. Se kèk moun ki ta panse ke òf proteinaz K ta yon pwoblèm.
Avèk epidemi nouvo kowonaviris la, demann pou tès asid nikleyik la ogmante anpil. Depi fen mwa jen 2020, Lachin te fin fè prèske 90 milyon nouvo tès kouwon, e chif sa a pi alarmant toujou sou yon echèl mondyal. Nan eksperyans ekstraksyon asid nikleyik yo, konsantrasyon pwoteyin K a se anviwon 50-200 μg/mL. Anjeneral, li pran anviwon 100 μg pwoteyin K pou ekstrè yon echantiyon asid nikleyik. Nan itilizasyon reyèl, pou ogmante efikasite ekstraksyon asid nikleyik la, souvan yo itilize pwoteyin K nan yon kantite ogmante. Deteksyon asid nikleyik nouvo kowonaviris la te pote yon gwo kantite demann pou pwoteyin K. Balans orijinal òf ak demann pwoteyin K a te byen vit kraze, e pwoteyin K te vin tounen yon materyèl enpòtan pou prevansyon epidemi nan yon sèl nwit.
Difikilte nan pwodiksyon pwoteyinaz K
Malgre ke avèk devlopman epidemi an, moun yo te kòmanse apresye enpòtans pwoteyinaz K a, li anbarasan ke akòz twòp mank pwoteyinaz K a, se kèk konpayi lokal sèlman ki te patisipe nan pwodiksyon pwoteyinaz K a. Lè moun te vle etabli pwodiksyon pwoteyinaz K. Pandan pwosesis pwodiksyon an, yo te dekouvri ke pwoteyinaz K se yon pwoteyin ki vrèman espesyal. Li trè difisil pou ogmante kapasite pwodiksyon pwoteyinaz K a nan yon kout peryòd de tan.
Pwodiksyon pwoteyinaz K sou gwo echèl la fè fas ak difikilte sa yo:
1. Ekspresyon ki ba
Pwoteinaz K ka degrade pifò pwoteyin yo yon fason ki pa espesifik epi lakòz yon toksisite grav pou selil lame ki eksprime pwoteyinaz K a. Se poutèt sa, nivo ekspresyon pwoteyinaz K a jeneralman trè ba. Tès depistaj sistèm ekspresyon ak souch ki eksprime pwoteyinaz K anpil jeneralman mande yon sik ki pi long.
2. Rès pigman ak asid nikleyik
Fèmantasyon sou gwo echèl prezante yon gwo kantite pigman ak rezidi asid nikleyik lame a. Li difisil pou retire enpurte sa yo ak yon pwosesis pirifikasyon senp, epi pirifikasyon konplèks ogmante pri a epi diminye to rekiperasyon an.
3. Enstabilite
Pwoteinaz K pa ase estab, li ka anzimolize tèt li, epi li difisil pou estoke li yon fason ki estab nan 37°C pou yon bon bout tan san yon ajan pwoteksyon.
4. Fasil pou presipite
Lè w ap prepare poud proteinaz K ki konjele-seche a, pou asire ke kontni solid proteinaz K nan poud ki konjele-seche a wo, li nesesè pou ajoute yon ajan pwoteksyon konjele-seche nan yon konsantrasyon ki wo, men lè konsantrasyon proteinaz K a rive nan 20mg/mL ak plis, li fasil pou agregasyon an fòme yon presipite, sa ki pote gwo difikilte pou konjele-seche proteinaz K ki gen yon kontni solid ki wo.
5. Gwo envestisman
Pwoteinaz K gen yon aktivite pwoteyaz fò epi li ka idrolize lòt pwoteyaz nan laboratwa a. Se poutèt sa, pwoteyinaz K mande zòn pwodiksyon espesyalize, ekipman ak pèsonèl pou rechèch, devlopman ak pwodiksyon.
Solisyon pwoteinaz K XD BIOCHEM lan
XD BIOCHEM gen yon platfòm ekspresyon ak pirifikasyon pwoteyin ki byen devlope, epi li gen yon eksperyans rich nan ekspresyon ak pirifikasyon pwoteyin rekombinan ak optimize pwosesis pwodiksyon yo. Gras a fòmasyon rapid yon ekip rechèch ak devlopman, pwosesis pwodiksyon pwoteyinaz K a sou gwo echèl la te simonte. Pwodiksyon chak mwa poud friz-seche a se plis pase 30 KG. Pwodwi a gen yon pèfòmans ki estab, yon aktivite espesifik anzim ki wo, epi pa gen okenn rezidi sitokrom ak asid nikleyik. Byenveni pou kontakte XD BIOCHEM. Jwenn yon pake esè (Imèl:sales@xdbiochem.comTelefòn: +86 513 81163739).
Solisyon teknik XD BIOCHEM yo gen ladan yo
Lè yo itilize entegrasyon plasmid milti-kopi, yo chwazi souch ki gen gwo ekspresyon ak yon nivo ekspresyon 8g/L, sa ki simonte pwoblèm nivo ekspresyon ki ba nan proteinaz K.
Gras a etablisman yon pwosesis pirifikasyon an plizyè etap, yo te retire avèk siksè rezidi sitokwòm lame a ak rezidi asid nikleyik proteinaz K a anba valè estanda a.
Atravè tès depistaj wo-debi fòmilasyon tampon pwoteksyon yo, yo te chwazi yon tampon ki ka estoke proteinaz K yon fason ki estab nan 37°C.
Tanpon tès depistaj yo simonte pwoblèm fasil pou pwoteyinaz K pou rasanble epi presipite nan gwo konsantrasyon, epi yo poze fondasyon pou siye pa konjelasyon ki gen anpil solid pwoteyinaz K a.
Echantiyon pwoteinaz K XD BIOCHEM
Tès estabilite pwoteyinaz K XD BIOCHEM: pap gen okenn chanjman siyifikatif nan aktivite apre 80 jou nan tanperati chanm.
Tès estabilite proteinaz K XD BIOCHEM: pap gen okenn chanjman siyifikatif nan aktivite apre 80 jou nan tanperati chanm.
Konparezon efè ekstraksyon asid nikleyik pwoteyinaz K XD BIOCHEM ak pwodwi konpetitif yo. Nan pwosesis ekstraksyon asid nikleyik la, yo itilize XD BIOCHEM ak pwoteyinaz K konpetitif respektivman. Efikasite ekstraksyon pwoteyinaz K XD BIOCHEM lan pi wo epi valè Ct jèn sib la pi ba.
Dat piblikasyon: 31 Desanm 2021