Gen anpil ewo enkoni bò kote nou, ki sanble yo òdinè, men an reyalite yo an silans kontribye anpil nan nou.Proteinase K se "ewo enkoni" nan endistri dyagnostik molekilè a, byenke konpare ak "gwo ak pwisan" nan endistri a, proteinase K se tèlman ba-kle ke nou gen tan neglije enpòtans li yo.Ak epidemi nouvo kouwòn epidemi an, demann pou proteinase K te monte, ak rezèv la nan kay ak aletranje se byen lwen dèyè konsomasyon an, ak tout moun toudenkou reyalize ke proteinase K tèlman enpòtan.
Ki sa ki sèvi ak proteinaz K?
Proteinase K se yon proteaz serin ak aktivite anzim proteolitik epi li ka kenbe aktivite nan yon pakèt anviwònman (pH (4-12.5), tanpon ki gen anpil sèl, tanperati ki wo nan 70 ° C, elatriye).Anplis de sa, aktivite proteinaz K pa anpeche SDS, ure, EDTA, idroklorid guanidin, isothiocyanate guanidine, elatriye, ak yon sèten kantite detèjan kapab tou amelyore aktivite proteinaz K. Nan tretman medikal (viris ak dezenfeksyon mikwòb). ), manje (tandirizasyon vyann), kwi (dousman cheve), vin (klarifikasyon alkòl), preparasyon asid amine (plim degrade), ekstraksyon asid nikleyik, ibridizasyon in situ, elatriye, proteinaz K Gen aplikasyon.Aplikasyon ki pi souvan itilize se ekstraksyon asid nikleyik.
Proteinase K ka enzymolyze tout kalite pwoteyin nan echantiyon an, ki gen ladan histones sa yo ki byen mare nan asid nikleyik, pou ke asid nikleyik yo ka lage nan echantiyon an epi lage nan ekstrè a, fasilite pwochen etap la nan ekstraksyon ak pirifikasyon.Nan deteksyon asid nikleyik viral, proteinaz K se youn nan eleman enpòtan nan solisyon echantiyon viris la.Proteinase K ka krak ak inaktive pwoteyin rad viris la, ki pi an sekirite pandan etap transpò ak deteksyon;nplis de sa, proteinase K kapab tou degrade RNase anpeche degradasyon RNA viral ak fasilite deteksyon asid nikleyik.
T'ap nonmen non an nan proteinase K
Kit nan domèn rechèch syantifik oswa nan domèn IVD, ekstraksyon asid nikleyik se eksperyans ki pi fondamantal, kidonk proteinaz K te toujou yon egzistans trè enpòtan.Sepandan, nan tan lontan an, proteinase K te byen lwen mwens byen li te ye pase wòl li yo.Yon gwo pati nan sa a se paske relasyon an rezèv ak demann nan proteinase K te trè estab.Gen kèk moun ki ta panse ke rezèv la nan proteinaz K ta dwe yon pwoblèm.
Avèk epidemi nouvo kouwòn lan, demann pou tès asid nikleyik te ogmante.Nan fen mwa jen 2020, Lachin te konplete prèske 90 milyon nouvo tès kouwòn, e nimewo sa a se menm plis alarmant sou yon echèl mondyal.Nan eksperyans ekstraksyon asid nikleyik, konsantrasyon k ap travay nan proteinaz K se apeprè 50-200 μg / mL.Anjeneral, li pran apeprè 100 μg nan proteinaz K pou ekstrè yon echantiyon nan asid nikleyik.Nan itilizasyon aktyèl la, yo nan lòd yo ogmante efikasite nan ekstraksyon asid nikleyik, souvan Proteinase K yo pral itilize nan yon kantite lajan ogmante.Deteksyon asid nikleik nouvo coronavirus la te pote yon gwo kantite demann proteinaz K.Ekilib orijinal la ak demann nan proteinase K te byen vit kraze, ak proteinase K te vin tounen yon materyèl prevansyon epidemi enpòtan lannwit lan.
Difikilte nan pwodiksyon proteinaz K
Malgre ke ak devlopman nan epidemi an, valè a enpòtan nan proteinase K te valè pa moun, li se anbarasan ke akòz twòp ba-kle nan proteinase K, kèk konpayi domestik yo te patisipe nan pwodiksyon an nan proteinase K. Lè moun. vle etabli pwodiksyon proteinaz K Pandan pwosesis pwodiksyon an, li te dekouvri ke proteinaz K se yon pwoteyin trè espesyal.Li trè difisil pou elaji kapasite pwodiksyon proteinaz K nan yon kout peryòd de tan.
Pwodiksyon nan gwo echèl nan proteinase K fè fas a difikilte sa yo
1. ba ekspresyon
Proteinase K ka degrade pi fò pwoteyin ki pa espesifik epi lakòz toksisite grav nan selil lame ekspresyon an.Se poutèt sa, nivo ekspresyon proteinaz K jeneralman ba anpil.Depistaj sistèm ekspresyon ak tansyon ki eksprime anpil proteinaz K jeneralman mande pou yon sik ki pi long.
2. rès pigman ak asid nikleyik
Fermantasyon gwo-echèl entwodui yon gwo kantite pigman ak rezidi asid nikleyik lame.Li difisil pou retire enpurte sa yo ak yon pwosesis pirifikasyon senp, ak pirifikasyon konplèks ogmante pri a ak diminye pousantaj rekiperasyon an.
3. Enstabilite
Proteinase K pa estab ase, li ka enzymolyze tèt li, epi li difisil pou estoke li estab nan 37 ° C pou yon tan long san yon ajan pwoteksyon.
4. Fasil presipite
Lè w ap prepare poud friz-seche nan proteinaz K, yo nan lòd yo asire ke kontni an solid nan proteinaz K nan poud nan friz-seche se gwo, li nesesè ajoute yon ajan pwoteksyon friz-seche nan yon konsantrasyon segondè, men lè a. konsantrasyon nan proteinaz K rive nan 20mg / mL ak pi wo a, li fasil Agregasyon an fòme yon presipite, ki pote gwo difikilte nan friz-seche nan proteinaz K ak yon kontni solid ki wo.
5. Gwo envestisman
Proteinase K gen gwo aktivite pwoteaz epi li ka idrolize lòt proteaz nan laboratwa a.Se poutèt sa, proteinase K mande zòn pwodiksyon espesyalize, ekipman, ak pèsonèl pou rechèch ak devlopman ak pwodiksyon.
XD BIOCHEM nan proteinase K solisyon
XD BIOCHEM gen yon ekspresyon pwoteyin ki gen matirite ak platfòm pou pirifye, e li gen eksperyans rich nan ekspresyon ak pirifikasyon nan pwoteyin recombinant ak optimize nan pwosesis pwodiksyon an.Atravè fòmasyon an rapid nan yon ekip rechèch ak devlopman, pwosesis pwodiksyon an gwo echèl nan proteinase K te simonte.Pwodiksyon an chak mwa nan friz-seche poud se plis pase 30 KG.Pwodwi a gen pèfòmans ki estab, gwo aktivite espesifik anzim, epi pa gen okenn cytochrome ak rezidi asid nikleyik.Byenveni nan kontakte XD BIOCHEM Jwenn yon pake esè (Imel:sales@xdbiochem.comTel: +86 513 81163739).
Solisyon teknik XD BIOCHEM yo enkli
Sèvi ak entegrasyon plasmid milti-kopi, yo chwazi tansyon wo-ekspresyon ak yon nivo ekspresyon de 8g / L, ki genyen batay la pwoblèm nan nivo ekspresyon ki ba nan proteinaz K.
Atravè etablisman an nan yon pwosesis pou pirifye milti-etap, cytochrome lame a ak rezidi asid nikleyik nan proteinase K yo te retire avèk siksè pi ba pase valè estanda a.
Atravè tès depistaj wo-debi nan fòmilasyon tanpon pwoteksyon, yo te chwazi yon tanpon ki ka estab pwoteyinz K nan 37 ° C.
Tanpon tès depistaj simonte pwoblèm ki fè konnen proteinaz K fasil pou rasanble ak presipite nan gwo konsantrasyon, epi li poze fondasyon pou siye friz ki gen gwo kontni solid nan proteinaz K.
XD BIOCHEM proteinase K echantiyon
Tès estabilite XD BIOCHEM proteinase K: pa pral gen okenn chanjman enpòtan nan aktivite apre 80 d nan tanperati chanm.
Tès estabilite XD BIOCHEM proteinase K: pa pral gen okenn chanjman enpòtan nan aktivite apre 80 d nan tanperati chanm.
Konparezon efè ekstraksyon asid nikleyik XD BIOCHEM proteinase K ak pwodwi konpetisyon.Nan pwosesis ekstraksyon asid nikleyik, XD BIOCHEM ak konpetitif proteinase K yo itilize respektivman.Efikasite ekstraksyon XD BIOCHEM proteinase K pi wo ak valè Ct jèn sib la pi ba.
Tan pòs: 31 desanm 2021