Ki jan yo detèmine konsantrasyon an pi bon?
Pou pwodiktè IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), pi wo konsantrasyon an, pi bon an.Konsantrasyon pi bon an depann sou kondisyon espesifik eksperimantal yo ak efè endiksyon vle a.
Anjeneral, konsantrasyon IPTG yo itilize nan seri 0.1-1 mM.Konsantrasyon ki pi ba yo ka diminye efè negatif sou kwasans selil epi yo ka diminye sitotoksisite akòz twòp ekspresyon nan pwoteyin sib yo.Pi wo konsantrasyon ka lakòz twòp fado metabolik selilè, ki afekte kwasans selil ak efikasite ekspresyon.
Fason pou detèmine konsantrasyon pi bon an ka evalye nivo ekspresyon pwoteyin sib la lè w fè tès endiksyon IPTG nan diferan konsantrasyon.Tès kilti ti-echèl yo ka fèt lè l sèvi avèk yon seri de konsantrasyon IPTG (egzanp 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, elatriye) epi yo ka evalye efè ekspresyon nan diferan konsantrasyon lè yo detekte nivo ekspresyon pwoteyin sib la (egzanp Western. blot oswa deteksyon fliyoresan).Dapre rezilta eksperimantal yo, yo te chwazi konsantrasyon ki gen pi bon efè ekspresyon kòm konsantrasyon optimal.
Anplis de sa, ou ka refere tou a literati ki enpòtan oswa eksperyans nan lòt laboratwa yo konprann ranje konsantrasyon IPTG souvan itilize nan kondisyon eksperimantal menm jan an, ak Lè sa a, optimize ak ajiste selon bezwen yo eksperimantal.
Li enpòtan pou sonje ke konsantrasyon pi bon an ka varye selon diferan sistèm ekspresyon, pwoteyin sib, ak kondisyon eksperimantal, kidonk li pi bon pou optimize sou yon baz ka-pa-ka.
Tan pòs: 28-Sep 2023